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1.抗凝素：EDTA：乙二胺四乙酸盐作用：与血液中钙离子结合成螯合物，凝血过程中断。用途：全血细胞计数，离心法血细胞比容(HCT)测定,注意事项：抗凝剂用量和血液的比例，采血后须立即混匀;枸橼酸钠：作用：与血液中钙离子结合 用途：血沉，抗凝试验，血液保养液 注意事项：抗凝能力相对较弱，抗凝剂浓度，体积和血液的比例非常重要;肝素：作用：加强抗凝血酶灭活丝氨酸蛋白酶，阻止凝血酶形成。用途：可用于血浆的生化，免疫项目，如血气分析;肝素锂适用于红细胞渗透渗滤试验，微量离心法HCT测定。注意事项：电极法测血钾与血清结果有差异，不适合血常规检查;草酸盐：作用：草酸盐与血液中钙离子形成草酸钙沉淀。用途：草酸钾干粉常用于血浆标本抗凝。注意事项:容易造成钾离子污染其他检测项目，显应用已减少

2.血涂片制备方法：1.薄血膜推片法：用血量少操作简单是应用最广泛的方法2.厚血膜涂片法对疟原虫微丝蚴等检查的阳性检出率高3自动涂片法可获得分布均匀形态完好的血涂片 血液1滴于载玻片的一侧，用推片一端从血滴前方接触血液，推片与载玻片保持30°~45°夹角，平稳推动，即在载玻片上形成厚薄适宜的血

3.良好血涂片标准：1一张合格的血涂片应该是:厚薄适宜，血膜头体尾分明，分布均匀，两侧留有一定的空隙，边缘整齐2.血细胞从厚区到薄区逐步均匀分布，在镜检区域内，白细胞应无人为异常改变。

4.制备良好血涂片的影响因素1载玻片应清洁、中性、无油腻2血膜厚度长度与血滴大小，推片与载玻片之间的角度，推片速度及HCT有关，血滴大，角度大，推片速度快则血膜厚，反之则血膜薄3HCT低于正常时，血液较稀，则应用较大的角度和较快的推片速度，才可获得满意的血涂片3血涂片需及时干燥，固定，妥善保存。

5.wright染色法原理1.物理吸附与化学亲和作用：血涂片染色过程，既有物理吸附作用，又有化学亲和作用。由于血细胞内不同结构所含的化学成分不同，对各种染料的亲和力也不同Wright 染液是由伊红和亚甲蓝溶解于甲醇而成。2.ph的影响：血细胞多种成分，属于蛋白质。由于蛋白质系两性电解质。所带电荷随着溶液的ph而定。染色时常用缓冲液ph6.4-6.8来调节染色时的ph以达到满意的染色效果3.甲醇的作用：溶解伊红和亚甲蓝，具有很强的脱水作用可以固定红细胞形态提高对染料的吸附作用，增强染色效果。标记血涂片，加Wright染液，加缓冲液，冲洗染液，判断染色结果4.甘油的作用：可防止甲醇蒸发，同时也可使细胞着色清晰。

6.红细胞计数：方法：显微镜法，血液分析仪法。原理：采用等渗稀释液讲血液标本稀释一定倍数，充入改良牛鲍血细胞计数板中，在显微镜下计数一定区域体积内的红细胞数量，经换算求出每升血液中红细胞数量。参考区间：成年男性：(4.0~5.5)X10 12女性：(3.5~5.0)X10 12

7.红细胞生理性变化的临床意义1生理性增多缺氧，雄激素增高，肾上腺皮质激素增多，长期重度吸烟。静脉压破时间大于两分钟。毛细血管血比静脉血测定结果增高。日内差异，药物影响 生理性减低见于生理性贫血生长发育过快导致造选料相对不足。造血功能减退血容量增加长期饮酒2病理性增多相对性增多是容量减少是红细胞相对增多。绝对增多包括继发性增多和原发性增多。继发性增多，主要见于组织缺氧促红细胞生成素代偿性增高。原发性增多，如真性红细胞增多症。3病理性减少见于各种原因导致的贫血。红细胞生成减少：骨髓功能衰竭的再生障碍性贫血，急性造血功能停滞的。造血物质缺乏，或利用障碍。 红细胞破坏过多 红细胞丢失

8.红细胞形状异常的机制及临床意义1.球形红细胞是遗传性球形红细胞增多症.自身免疫性溶血性贫血，异常血红蛋白病。 2.靶型红细胞各种低色素性贫血，尤其珠蛋白生成障碍性贫血.胆汁淤积性黄疸.脾切除后，肝病。3镰型红细胞:镰状细胞性贫血

9.血红蛋白检测方法(HICN)的原理及评价:原理:氰化高铁血红蛋白测定原理:血红蛋白中的fe2 被高铁氰化钾氧化为fe3 。血红蛋白转化为HI,HI与KCN中的氰离子反应生成HICN.HICN最大吸收峰为540nm，波谷为504nm.在特定条件下,HICN 毫摩尔消光系数为44L/(mmol·cm),HiCN在540nm处的吸光度与浓度成正比，可根据测得吸光度求得血红蛋白浓度。评价优点: HiCN测定法能够测定出shb以外的所有血红蛋白。参考方法操作简单，反应速度快，可以检测出shb之外的所有hb。产物稳定，便于质控，试剂容易保存。缺点是KCN有剧毒，可是高白细胞高球蛋白血症的标本混浊。对HbCO的反应慢，不能测定SHb。参考区间：成年男性120-16