检验技师课程

血液涂片制备

考点一、载玻片的清洁(掌握)

新载玻片常带有游离碱质，必须用约lmol/L HCl浸泡24h，清水冲洗，干燥后备用。用过的载玻片可用适量肥皂或其他洗涤剂煮沸20min，趁热刷去血膜，清水冲洗，必要时蒸馏水浸泡，干燥后备用。要保持载玻片的清洁、干燥、中性、无油腻。

考点二、血涂片的制备(熟练掌握)

1.手工推片法：涂片时，推片与载玻片保持25°～30°夹角。

2.厚血膜涂片法：临床上常用厚血膜法检查疟原虫与微丝蚴。

3.良好血涂片标准：厚薄适宜、头体尾分明、细胞分布均匀、血膜边缘整齐、两侧有一定空隙、血膜占玻片的2/3。

4.方法学评价：手工推片法用血量少、操作简单，是应用最广泛的方法。此外，疟原虫、微丝蚴等检查可采用厚血膜涂片法。

5.质量控制：血细胞比容增高，血液黏度较高时，应小血滴、小角度、慢推，反之亦然。新载玻片必须用1mol/L的盐酸清洗后才能使用。

血液细胞染色

考点一、瑞氏染色(熟练掌握)

瑞氏染色是血涂片最常用、最经典的染色方法，对细胞质和颗粒染色效果好。

1.染液组成：碱性亚甲蓝、酸性伊红、甲醇(作为溶剂及固定细胞形态)。

2.原理：物理吸附和化学亲和作用。

3.染色效果：最适pH为6.4～6.8。若缓冲液偏酸，则红细胞和嗜酸性粒细胞偏红，细胞核呈淡蓝色或不着色。若缓冲液偏碱，细胞染色染成灰蓝色，颗粒深暗;嗜酸性粒细胞可染成暗褐色，甚至棕黑色;中性颗粒偏粗，染成紫黑色。

4.注意事项：(1)在距玻片另一端2cm处结束涂抹为宜;(2)血涂片上有染料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗;(3)染色过淡，可复染，复染时先加缓冲液再加染液;(4)新鲜配制的染液染色效果差，应贮存一段时间，时间越久，染色效果好。

考点二、吉姆萨染色(了解)

吉姆萨染色对细胞核和寄生虫着色较好。

1.染液组成：天青、伊红、甲醇、纯甘油。

2.原理：同瑞氏染色。

记忆方法：血红蛋白，嗜酸性颗粒(碱性蛋白质)：具有嗜酸性——伊红结合;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质(酸性蛋白质)：具有嗜碱性——亚甲蓝结合。