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检验职称免疫电泳技术相关考点

免疫电泳法

免疫电泳法是指利用凝胶电泳与双向免疫扩散两种技术结合的实验方法。在电场作用下标本中各组分因电泳迁移率不同而分成区带，然后沿电泳平行方向将凝胶挖一沟槽，将抗体加入沟槽内，使抗原与抗体相互扩散而形成沉淀线。根据沉淀线的数量、位置及形状，以分析标本中所含组分的性质，本实验常用于抗原分析及免疫性疾病的诊断。此法在微量的基础上具有分辨率高，灵敏度高，时间短，是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。

免疫固定电泳

免疫固定电泳是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。血清IFE可检测IgG、IgM、IgA等及κ轻链、λ轻链。原理是将样本在琼脂平板上作区带电泳，分离后其上覆盖抗血清滤纸，滤纸分别含抗κ轻链、抗λ轻链，或抗各类重链抗血清，当抗体与某区带中的单克隆Ig结合，可形成免疫复合物沉淀，即固定，再通过漂洗与染色，呈现浓而窄的着色区带，即可判别单Ig的轻链和重链的类别。血清样本要求使用免疫项目蓝色管采集静脉血，避免溶血。

交叉免疫电泳

用琼脂糖作支持物，先将抗原经电泳展开，然后在同一玻板上浇注含抗体的琼脂糖凝胶，在后一个凝胶中进行第二次电泳(与第一次电泳方向垂直)。这种方法实际上是在凝胶电泳后进行免疫电扩散。不同抗原形成互相独立的峰状免疫沉淀，至最适抗原/抗体比值处停止运动，沉淀峰的高度和面积与抗原量成比例关系。用此法可进行各种抗原的定量测定。