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酶活性和质量测定方法及其评价

酶测定包括酶量测定和酶活性测定。

酶在体液中含量极微，因此临床上大都采用酶活性测定，以酶活性间接表示酶量。

酶活性的概念：酶活性指酶催化反应的能力即酶促反应速度。

反应速度是指在规定条件下单位时间内底物的减少量或产物的生成量。

1.酶活性测定方法

（1）按反应时间分类法

1）定时法：（两点法） 通过测定酶反应开始后某一时间段内（t1到t2）产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。

2）连续监测法：（动力学法或速率法、连续反应法）酶反应过程中，用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变，通过计算求出酶反应初速度。

3）平衡法：（终点法） 通过测定酶反应开始至反应达到平衡时产物或底物浓度总变化量来求出酶活力的方法。

（2）按监测方法分类法

①分光光度法

②旋光法

③荧光法

④电化学方法

⑤化学反应法

⑥核素测定法

⑦量热法

2.酶质量测定法

利用酶的抗原性，通过抗原、抗体反应来直接测定酶的质量，直接用质量单位ng/ml、μg/L来表示酶含量的高低。

免疫学方法与测定活性方法相比，其优点是灵敏度和特异性高，不受体液中其他物质的影响，特别是抑制剂和激活剂的影响。